کاربرد
آنزیم همچنین بهمراه سایر پروتئازها برای تجزیه تومور انسان ، کلیه موش ، مغز انسان و بافتهای اپیتلیال ریه استفاده شده است. همچنین در مطالعات پرفیوژن کبد و کلیه ، هضم لوزالمعده ، جداسازی سلولهای کبدی موش غیرپارنشیمی و سلولهای کبدی مفید است. از آنزیم سیگما برای هضم کلاژن نوع I استخوان های ترابکولار و قشر گاو استفاده شده است.همچنین از آن به عنوان کنترل مثبت در روش FALGPA در سلولهای استرپتوکوکی گروه B استفاده شده است.
اقدامات Biochem / Physiol
آزاد سازی موثر سلولها از بافت به عملکرد آنزیم های کلاژناز و پروتئاز خنثی نیاز دارد. کلاژناز توسط چهار گرم اتم کلسیم ( Ca2+ ) در هر آنزیم مول فعال می شود. تصور می شود که فیلتر فیلتر حاوی حداقل 7 پروتئاز مختلف باشد که از نظر وزن مولکولی از 68-130 کیلو دالتون متغیر هستند. محدوده بهینه pH از 6.3-8.8 است. از آنزیم معمولاً برای هضم اجزای همبند نمونه های بافتی برای آزادسازی سلولهای منفرد استفاده می شود. درمان کلاژناز می تواند باعث از بین رفتن برخی سلول ها شود. به طور معمول ، غلظت های مختلف از 0.1 تا 5 میلی گرم در میلی لیتر برای هضم غذا استفاده می شود. مدت زمان واکنش از 15 دقیقه تا چند ساعت برای یک کارایی رضایت بخش از تفکیک سلول بدون ایجاد مرگ سلول زیاد متفاوت است. بافر کربس رینگر با کلسیم و BSA ترجیح داده می شود و روی2+ برای فعالیت لازم است. آنزیم توالی -R-Pro-8-X-Gly-Pro-R- را تشخیص می دهد ، جایی که X اغلب یک اسید آمینه خنثی است. اتیلن گلیکول-بیس (β-آمینو اتیل اتر) -N ، N ، N ′ ، N′-تتراساس
کلاژناز توسط چهار گرم اتم کلسیم در هر آنزیم مول فعال می شود. این توسط اتیلن گلیکول-بیس (بتا آمینو اتیل
احتیاط
همانطور که عرضه شده است ، این محصول به مدت یک سال در دمای -20 درجه سانتیگراد پایدار است. در FALGPA یا فعالیت پروتئاز در طی 30 روز در دمای 37 درجه سانتیگراد ، 50 درجه سانتیگراد و -20 درجه سانتیگراد از دست دادن وجود ندارد محلولهای کلاژناز خام در صورت منجمد شدن سریع در مقادیر (با میلی گرم 10 میلی گرم در میلی لیتر) پایدار هستند و در دمای 20- درجه سانتیگراد منجمد نگه داشته می شوند. چرخه های انجماد و ذوب بیشتر به محلول آسیب می رساند. این محصول هنگام نگه داشتن روی یخ ، در طول 7 ساعت 100٪ فعالیت خود را حفظ می کند.
تعریف واحد
یک واحد هضم کلاژن (CDU) ، پپتیدهای موجود در کلاژن را از معادل تاندون آشیل گاو به رنگ نین هیدرین به 1.0 میکرومول لوسین در 5 ساعت در pH 7.4 در 37 درجه سانتیگراد در حضور یون های کلسیم آزاد می کند. یک واحد هیدرولیز FALGPA
یادداشت آماده سازی
این محصول معادل اولین کسر سولفات آمونیوم 40٪ Mandl، I.، et al.، J. Clin است. سرمایه گذاری . ، 32 ، 1323 (1953). محلول ها به طور معمول در میلی گرم 1-2 میلی لیتر در بافر TESCA (حاوی 50 میلی مولار TES ، 0.36 میلی مولار کلرید کلسیم ، pH 7.4 در دمای 37 درجه سانتی گراد) تهیه می شوند
شماره MDL | MFCD00130830 |
شماره EC | 232-582-9 |
شماره کمیسیون آنزیم (EC) | 3.4.24.3 (BRENDA | IUBMB) |
شماره CAS | 9001-12-1 |
NACRES | NA.54 |
mol wt | 68-130 کیلو دالتون |
دمای ذخیره سازی | −20 درجه سانتیگراد |
فرم | در اصل پودر لیوفیلیزه بدون نمک |
حمل شده در | یخ مرطوب |
صنعت برجسته | ساخت روش تشخیصی |
سطح کیفیت | 200 |
انحلال پذیری | بافر TESCA (50 میلی متر TES ، 0.36 میلی متر کلرید کلسیم ، pH 7.4): محلول |
: