EDTA تریپسین 100 میلی زیگما، محصول شرکت Sigma-Aldrich است. این محصول حاوی EDTA و تریپسین بوده و به عنوان یک روش برش سلولی در آزمایشگاههای بیولوژیکی استفاده میشود. EDTA تریپسین 100 میلی زیگما، با اندازهگیری دقیق و محکم و افزودنی مناسب، توانسته است روشی دقیق و بهصرفه برای برش سلولی ارائه دهد. این محصول در بستهبندی 100 میلیلیتری در دمای 2-8 درجه سانتیگراد نگهداری میشود.
EDTA تریپسین 100 میلی زیگما، برای برش سلولی بهکار میرود. تریپسین، یک پروتئاز است که از طریق شکستن پیوند پپتیدی بین اسید آمینههای آرگینین و لیزین در پروتئینها، باعث شکستن اتصالات بین سلولها و جدا شدن سلولها از یکدیگر میشود. EDTA نیز بهعنوان یک کلاتور کلسیم، که با متشکل شدن کمپلکس با کلسیم، از دخول کلسیم بهدرون سلولها و جلوگیری از تشکیل دیوارهای سلولی در هنگام برش سلولی جلوگیری میکند. این دو ترکیب با هم ترکیب شده و در EDTA تریپسین 100 میلیلیتری در نسبتهای مشخص بهکار میرود.
در آزمایشگاههای بیولوژیکی، EDTA تریپسین 100 میلی زیگما برای جدا کردن سلولها از بافت و افزایش تعداد سلولهای قابل مشاهده در محیط کشت، بهکار میرود. در هنگام استفاده از این محصول، بهتر است از لوازم بهداشتی مناسب، مانند دستکش، استفاده شود و با ایجاد اتصالاتی بین سلولها، محیطی پاسخگو به سلولها فراهم شود. همچنین، نکته مهم دیگر، تنظیم دمای محیط برش سلولی بهصورت دقیق است تا از تاثیرات مخرب ناشی از تغییرات دما در برش سلولی جلوگیری شود.
محلول تریپسین-EDTA (Trypsin-EDTA solution) یک محلول پروتئینازی است که برای جداسازی سلولها از سطح بافت مورد استفاده قرار میگیرد. این محلول شامل تریپسین و EDTA است که به ترتیب با فعال کردن پروتئیناز تریپسین و با تثبیت یون کلسیم، باعث تخریب ماتریس اکستراسلولار و جداسازی سلولها از سطح بافت میشود.
در ترکیب تریپسین-EDTA، تریپسین یک پروتئیناز سریع و قوی است که پیوند پپتیدی بین اسید آمینه آرگینین و لیزین را بریده و ماتریس اکستراسلولار (ECM) سلولها را تخریب میکند. همچنین، EDTA با حذف یونهای کلسیم باعث تثبیت پروتئینهای سطحی سلولها و جداسازی آنها از سطح بافت میشود.
استفاده از محلول تریپسین-EDTA برای جداسازی سلولها، برای تمامی انواع سلولهای پوسته دار، از جمله سلولهای اپیتلیال، فیبروبلاستها و سلولهای سرطانی، استفاده میشود. همچنین، این محلول به طور گسترده در آزمایشات تخمینی برای بررسی اثر دارو و سموم بر سلولها، در کشت سلولهایی که برای استفاده در فرایندهای فناوری سلولی نیاز به سلولهای تکلایه دارند و در سایر آزمایشات سلولی به کار میرود.
تریپسین یک آنزیم پروتئیناز است که برای تفکیک سلولها از هم در فرآیند هضم بافت استفاده میشود. در کاربردهای آزمایشگاهی، تریپسین به عنوان یکی از اصلیترین آنزیمها برای تفکیک سلولها از یکدیگر استفاده میشود.
در آزمایشگاه، تریپسین به عنوان یک عامل هضمکننده سلولی برای به دست آوردن یک سلول تکلایه از بافتهای بدن استفاده میشود. با استفاده از تریپسین، پروتئینهای اتصال دهنده سلولی که سلولها را به یکدیگر متصل میکنند هضم میشوند و سلولها جدا شده و از یکدیگر جدا میشوند. این فرآیند به عنوان تفکیک سلولی شناخته میشود و برای بسیاری از بررسیهای سلولی و مولکولی مورد استفاده قرار میگیرد.
تریپسین به عنوان یک آنزیم پروتئیناز، برای شکست پروتئینهای سلولی به کار میرود و با اضافه کردن آن به محیط سلولی، مولکولهای پروتئینی در سلولها هضم میشوند. برای تهیه تریپسین، به طور معمول از باکتریهایی که تریپسین را تولید میکنند، استخراج میشود. همچنین، تریپسین میتواند به صورت تجاری از شرکتهایی که آن را تولید میکنند، تهیه شود.