توضیح عمومی: محیط رشد میکروبی 2x YT (2x Yeast Extract Tryptone medium) یک محیط استاندارد برای رشد باکتری E. coli و فاژ فرزی M13 است. این محیط که حاوی پپتیدها، اسیدهای آمینه و ویتامینهای حل شونده در آب در یک فرمول کم نمک است، برای کشت میکروبها استفاده میشود.
کاربرد: محیط 2x YT برای کشت باکتری E. coli BL21 برای کلونینگ، سلولهای E. coli SS320 برای سنتز چارچوب، و سلولهای E. coli متقاضی NEB 5-alpha برای آزمایشهای برچسبزنی مواقعه نزدیک به توالی پروتئین (PAM) مورد استفاده قرار گرفته است. همچنین در کشت باکتریهای Agrobacterium tumefaciens و E. coli DH10B نیز مورد استفاده قرار گرفته است.
ویژگیها و مزایا: پودر 2xYT علاوه بر ارائه فرمولاسیون استاندارد، جایگزین ارزانقیمتی برای محیط مایع فراهم میکند.
مواد تشکیلدهنده: 16 گرم برای لیتر تریپتون، 10 گرم برای لیتر عصارهی مخمر و 5 گرم برای لیتر نمک سدیم.
روش تهیه:
31 گرم پودر محیط میکروبی 2xYT را در 1 لیتر آب حل کنید.
با مخلوط کردن، به جوش بیاورید تا تمام مواد به طور کامل حل شوند.
به مدت 15 دقیقه در دمای 121 درجه سانتیگراد اتوکلاو کنید.
تجدید نظر:
31 گرم پودر را به 1 لیتر آب اضافه کرده، به جوش بیاورید و بعد از اتوکلاو به مدت 15 دقیقه در دمای 121 درجه سانتیگراد تجهیز شده و برای استریل کردن استفاده میشود. قبل از اضافه کردن موادی مانند آنتیبیوتیکها (اگر لازم است)، به خنک شدن اجازه دهید.